技術文章
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2023-43
血管平滑肌脂肪瘤是腎臟的良性腫瘤,起源于假定的血管周圍上皮樣細胞。這些細胞可能會分化成具有黑素細胞、平滑肌或脂肪細胞特征的細胞。然而,血管平滑肌脂肪瘤的研究因缺乏成熟的血管平滑肌脂肪瘤衍生細胞系和良好的動物模型而受到限制。hTERT永生化腎上皮細胞來源于血管平滑肌脂肪瘤,因此研究人員現在可以在體外利用這些細胞的原代細胞特性和延長的壽命。UMB1949細胞系表達NG2和L1,并且在塊蛋白(Tsc2)的外顯子33中有一個確定的5bp缺失,在塊蛋白(和/或錯構蛋白)中有突變。因此,...
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2023-43
據統計約30%細胞系被交叉污染或錯誤辨識,只因使用了交叉污染或錯誤辨識的細胞而導致研究結論錯誤、結果不可重復、臨床細胞治療災難性后果……,這將浪費大量時間、精力和金錢。世人皆知,細胞身嬌體貴難養活,養好細胞實屬不易。而這其中煩的是污染、怕的是掉包。因為盡管研究僧們有方法把一切污染的源頭扼殺在搖籃之內,卻沒有火眼金睛辨別已經換了馬甲的錯誤細胞。因而細胞一旦被李代桃僵,再資深的科研者都會陰溝里翻船,所以細胞鑒定顯得尤為重要。為什么要進行細胞系鑒定?進行細胞系STR鑒定是很重要的。...
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2023-331
類器官是復雜的3-D器官樣微組織,由多種分化的細胞類型組成,其結構組織類似于體內發現的細胞,具有中央腔和其他類似體內的結構特征。從ipsc誘導多能干細胞產生的類器官已被描述用于胃、腸、肺、大腦、腎、肝臟等各種組織,這些類器官是其他體外模型的有吸引力的替代品;這些微組織比2-D細胞培養或簡單的3-D球體聚集體更好地概括了體內組織表型,但沒有與器官外植體或組織切片相關的挑戰,例如培養壽命有限。事實上,類器官保留了許多細胞培養的典型有利特征,例如維持穩定培養數月的能力,以及冷凍保存...
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2023-331
大多數細胞系和原代細胞培養物生長為單一厚度的細胞層(單層)或附著在玻璃或經過特殊處理的塑料基質上的薄片。為了保持培養物的健康和積極生長,通常需要定期對它們進行傳代培養。常見的傳代培養方法涉及通過使用蛋白水解酶(如胰蛋白酶或膠原酶)破壞細胞間和細胞與基質的連接。在細胞解離成主要由單細胞組成的懸浮液后,將它們稀釋并轉移到新的培養容器中。在那里它們可以重新附著并開始生長和分裂,經過一段時間的孵化后再次接近匯合。此時,它們可以再次進行傳代培養或用于實驗。以下指南描述了典型單層細胞培養...
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2023-329
hTERT成纖維細胞為永生化子宮內膜成纖維細胞(THESC)具有延長的壽命,并且在核型、形態和表型方面與原代親代細胞相似。在功能上,THESCs顯示激素治療后蛻膜化的生化終點。THESCs來源于從患有肌瘤的成年女性身上獲得的基質細胞。原代基質子宮內膜細胞通過用來自包裝細胞系pA317-hTERT的上清液感染而永生化,該細胞系表達hTERT和嘌呤霉素抗性基因。hTERT成纖維細胞培養方案如下:一、所需材料Dulbecco改良Eagle培養基(DMEM)/F12(Sigma,D2...
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