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降低CHO細胞培養(yǎng)中的乳酸水平的解決方案

乳酸是CHO細胞補料分批培養(yǎng)的主要副產品之一。在pH控制的生物反應器中，由于添加堿以控制細胞培養(yǎng)基的pH值，高水平乳酸的積累伴隨著高滲透壓，可能導致制造細胞生長緩慢，甚至大量凋亡，同時產生抗體蛋白的產量也降低不少。而乳酸脫氫酶(LDH)是一種催化底物丙酮酸轉化為乳酸的酶，包括丙酮酸濃度在內的許多因素都會調節(jié)LDH活性。乳酸脫氫酶對代謝產物的影響在一項研究中，科學家們曾嘗試敲低乳酸脫氫酶A(LDHa)和PDHK的基因表達，以研究對乳酸代謝和蛋白質生產的影響。他們發(fā)現(xiàn)，使用攜帶L...

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DNA克隆技術概述

當您聽到“克隆”一詞時，您可能會想到克隆整個生物體，例如綿羊多利。然而，克隆某物的全部意思就是制作它的基因精確副本。在分子生物學實驗室中，常被克隆的是基因或其他小片段DNA稱為DNA克隆。DNA克隆技術概述DNA克隆技術其實就是基因編輯，是指制作特定DNA片段的多個相同副本的過程。在典型的DNA克隆過程中，通常會將目的的基因或其他DNA片段插入稱為質粒的環(huán)狀DNA片段中。插入是使用“剪切和粘貼”DNA的酶完成的，它會產生一個重組DNA分子，或由多個來源的片段組裝而成的DNA。...

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實驗室儀器可以自校準嗎？

實驗室移液槍、實驗室天平、PH計等實驗室儀器使用一段時間后，需要對其進行校準，那么實驗室儀器可以自校準嗎？小編帶你了解一下：內部校準與自校準的區(qū)別“自校準”一般是利用測量設備自帶的校準程序或功能（比如智能儀器的開機自校準程序）或設備廠商提供的沒有溯源證書的標準樣品進行的校準活動，通常情況下，其不是有效的量值溯源活動，但特殊領域另有規(guī)定除外。“內部校準”是指在實驗室或其所在組織內部實施的，使用自有的設施和測量標準，校準結果僅用于內部需要，為實現(xiàn)獲認可的檢測活動相關的測量設備的量...

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DNA重組實驗技術總結

DNA重組技術，是分子的生物學研究生需要掌握的實驗技術之一，DNA重組實驗方法總結如下：一、實驗目的體外連接獲得重組分子，用于轉化受體細胞。二、實驗原理DNA重組技術是用內切酶分別將載體和外源DNA切開，經分離純化后，用連接酶將其連接，構成新的DNA分子。外源DNA片段和質粒載體的連接反應策略有以下幾種：1、帶有非互補突出端的片段用兩種不同的限制性內切酶進行消化可以產生帶有非互補的粘性末端，這也是最容易克隆的DNA片段，一般情況下，常用質粒載體均帶有多個不同限制酶的識別序列組...

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PCR儀使用參數(shù)設定注意事項

PCR儀使用參數(shù)設定注意事項PCR儀使用參數(shù)設定不正確會影響到PCR實驗結果，這主要表現(xiàn)在溫度、時間和循環(huán)次數(shù)上，如果溫度參數(shù)設置過高，延伸時間不夠都會對實驗結果造成影響，下面談談使用PCR儀參數(shù)設定時的注意事項：一、溫度和時間溫度與時間的設置：基于PCR原理三步驟而設置變性-退火-延伸三個溫度點。在標準反應中采用三溫度點法，雙鏈DNA在90～95℃變性，再迅速冷卻至40～60℃，引物退火并結合到靶序列上，然后快速升溫至70～75℃，在TaqDNA聚合酶的作用下，使引物鏈沿模...

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